在日化產(chǎn)品供人使用前，有必要對(duì)其進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，以便獲得準(zhǔn)確信息，確保消費(fèi)者的安全。可利用體外重組皮膚模型對(duì)日化產(chǎn)品進(jìn)行安全性評(píng)估，主要是針對(duì)日化產(chǎn)品成分可能造成的毒性，包括刺激性、腐蝕性、光毒性和遺傳毒性等。

日化產(chǎn)品安全評(píng)估-毒理試驗(yàn)體外評(píng)估方法

日化產(chǎn)品安全評(píng)估內(nèi)容

1.日化產(chǎn)品刺激性和腐蝕性試驗(yàn)

皮膚刺激是指皮膚接觸試驗(yàn)材料后，產(chǎn)生可逆的組織損傷，而皮膚腐蝕是指皮膚在接觸試驗(yàn)材料后，產(chǎn)生不可逆的組織損傷，通常通過(guò)檢測(cè)細(xì)胞活性的變化來(lái)定義有無(wú)刺激性和有無(wú)腐蝕性，根據(jù)歐洲替代方法驗(yàn)證中心(ECVAM)和經(jīng)濟(jì)與合作發(fā)展組織(OECD)給出的指南OECDTG439、OECD TG43124.以下內(nèi)容來(lái)定義刺激性和腐蝕性。

日化產(chǎn)品刺激性：

皮膚模型與日化產(chǎn)品成分接觸15 min后孵育42h，細(xì)胞活力≤50%，為刺激性

皮膚模型與日化產(chǎn)品成分接觸15min后孵育42h，細(xì)胞活力>50%且IL-1x釋放量>60pg/mL，為刺激性

皮膚模型與日化產(chǎn)品成分接觸15 min后孵育42h，細(xì)胞活力>50%且IL-1α釋放量≤60 pg/mL，為非刺激性

日化產(chǎn)品腐蝕性：

皮膚模型與日化產(chǎn)品成分接觸3min，細(xì)胞活力<50%，為腐蝕性

皮膚模型與日化產(chǎn)品成分接觸3 min，細(xì)胞活力≥50%，但1h后，細(xì)胞活力<15%，為腐蝕性

皮膚模型與日化產(chǎn)品成分接觸3min，細(xì)胞活力≥50%，但1h后，細(xì)胞活力≥15%，為非腐蝕性

為了使多種體外重組皮膚模型適用于皮膚腐蝕測(cè)試，在OECD給出的指南OECDTG431中，規(guī)定了模型在常規(guī)用于皮膚腐蝕測(cè)試之前必須滿足的條件，同時(shí)，該指南要求模型能夠正確評(píng)估丙烯酸、氫氧化鉀、苯乙基溴等12種參考化學(xué)物質(zhì)的腐蝕性。

通過(guò)檢測(cè)經(jīng)受試物處理之后重組皮膚模型的組織活力和炎癥因子的表達(dá)情況，評(píng)估相應(yīng)的刺激性和腐蝕性級(jí)別。

2.日化產(chǎn)品成分的光毒性試驗(yàn)

光毒性反應(yīng)是一種光誘導(dǎo)的急性反應(yīng)，當(dāng)光活性化學(xué)物質(zhì)被太陽(yáng)光激活并對(duì)皮膚具有毒性時(shí)，就會(huì)發(fā)生光毒性反應(yīng)，對(duì)皮膚造成損害。已知多種有機(jī)化學(xué)物質(zhì)會(huì)引起光毒性反應(yīng)，是因?yàn)樗鼈兊姆肿咏Y(jié)構(gòu)中普遍含有吸收太陽(yáng)光中紫外線的苯環(huán)或雜環(huán)。紫外線分為UVC(200~280nm)、UVB(290~320nm)和UVA(320~400nm)，并且皮膚長(zhǎng)期暴露在紫外線下，造成機(jī)體產(chǎn)生DNA損傷、氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)等一系列不良癥狀，從而導(dǎo)致皮膚癌發(fā)病率的增加。

國(guó)際多中心體外細(xì)胞毒性評(píng)估和ECVAM建議使用小鼠胚胎成纖維細(xì)胞3T3的中性紅攝取試驗(yàn)(3T3NRU)分析光毒性水平。

3.日化產(chǎn)品成分的遺傳毒性試驗(yàn)

遺傳毒性是一個(gè)廣義術(shù)語(yǔ)，指環(huán)境中的理化因素對(duì)生物體遺傳物質(zhì)造成損傷，從而給機(jī)體帶來(lái)毒性反應(yīng)。遺傳毒性測(cè)試通常通過(guò)評(píng)估點(diǎn)突變和染色體損傷來(lái)進(jìn)行，而微核是細(xì)胞受到染色體損傷時(shí)出現(xiàn)在細(xì)胞質(zhì)中的獨(dú)立于主核的微小核，它可能來(lái)自于細(xì)胞分裂后期不能與其他染色體一起遷移的柒色體片段或整條染色體，所以微核試驗(yàn)被認(rèn)為是通過(guò)評(píng)估染色體損傷進(jìn)而評(píng)估遺傳毒性的一種標(biāo)準(zhǔn)方法。

微核試驗(yàn)作為一種體內(nèi)評(píng)估染色體損傷的可靠方法不僅用于危險(xiǎn)識(shí)別還用于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，但之前常在哺乳動(dòng)物上進(jìn)行，有悖動(dòng)物福利和3R原則，利用重組皮膚模型進(jìn)行體外微核試驗(yàn)，有效地避開(kāi)了這種問(wèn)題，并解決了假陽(yáng)性率過(guò)高的缺點(diǎn)，而且此類模型可以更好的反應(yīng)體內(nèi)的復(fù)雜情況，比如吸收、代謝、組織特異性等，但還需大量實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證可靠性，盡早成為廣泛有效的遺傳毒性體外替代方法

日化產(chǎn)品安全評(píng)估-毒理試驗(yàn)體外評(píng)估方法